英文名稱：In Situ Cell Death Detection Kit, AP
中文名稱：原位細胞凋亡檢測試劑盒, AP

原位細胞凋亡檢測試劑盒, AP 產(chǎn)品介紹：
原位細胞凋亡檢測試劑盒廣泛應(yīng)用于檢測細胞凋亡，包括利用瓊脂糖凝膠電泳的基因組DNA分析和基于3H-胸腺嘧啶或5-溴-2’-脫氧尿嘧啶的DNA斷裂分析。細胞凋亡早期標志是核DNA連接區(qū)域的選擇性降解。DNA裂解將促使雙鏈或單鏈DNA斷裂。兩種類型斷裂都可用游離3’-OH末端標記的修飾核苷酸（比如，生物素-dUTP, 地高辛-dUTP, 熒光素-dUTP）在酶促反應(yīng)中檢測到。末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）催化脫氧核糖核苷酸獨立聚合為以3’-端結(jié)尾的單鏈和雙鏈DNA。這種方法被稱為TUNEL （TdT介導的dUTP-X 缺口末端標記）。游離3’-OH也可利用DNA聚合酶標記（模板依賴型的缺口平移）。但是，TUNEL方法更靈敏快速。

檢測原理：原位細胞凋亡檢測試劑盒基于對細胞凋亡早期發(fā)生的單鏈和雙鏈DNA斷裂的檢測。凋亡細胞被固定和滲透。隨后，這些細胞和TUNEL反應(yīng)混合物（包含TdT和熒光素-dUTP）一起孵育。孵育期間，TdT催化熒光素-dUTP標記的游離3’-OH添加到單鏈和雙鏈DNA中。清洗后，標記物包含在DNA斷裂位點處，并被抗熒光素抗體結(jié)合物識別標記（報告酶堿性磷酸酶）。清洗去除未結(jié)合的酶配體，AP保留在免疫復合物中，可通過底物反應(yīng)觀察到。

樣本材料：細胞離心涂片器和細胞涂片制備，載玻片上生長的貼壁細胞，冷凍和蠟包被的組織切片

產(chǎn)品特點：
靈敏：最大凋亡細胞標記強度（細胞染色），比缺口平移要高
快速：熒光素-dUTP標記使其在TUNEL反應(yīng)結(jié)束后直接可進行樣本分析（2-3 h）
方便：使用熒光素d-UTP直接標記法可在檢測時確認TUNEL反應(yīng)效率
準確：可在分子水平（DNA鏈斷裂）鑒定極早期凋亡細胞
靈活：不包含底物；可選擇不同染色方法

產(chǎn)品成份：
• 酶溶液（TdT）
• 標記溶液（熒光素-dUTP）
• 媒介物AP（抗-熒光素抗體-AP），即開可用