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Reactive Oxygen Species Assay Kit
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產(chǎn)品名稱(chēng):Beyotime 活性氧檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào): S0033S
英文名稱(chēng):Reactive Oxygen Species Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:>100次
產(chǎn)品介紹:
活性氧檢測(cè)試劑盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit,也稱(chēng)ROS Assay Kit)是一種利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測(cè)的試劑盒。DCFH-DA本身沒(méi)有熒光,可以自由穿過(guò)細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜,從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無(wú)熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測(cè)DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。
本試劑盒提供了活性氧陽(yáng)性對(duì)照試劑Rosup,以便于活性氧的檢測(cè)。Rosup是一種混合物(compound mixture),濃度為50mg/ml。
本試劑盒本底低,靈敏度高,線(xiàn)性范圍寬,使用方便。
本試劑盒S0033S包裝可以測(cè)定100-500個(gè)樣品,S0033M包裝可以測(cè)定500-2500個(gè)樣品。
產(chǎn)品使用說(shuō)明:
1. 裝載探針
對(duì)于刺激時(shí)間較短(通常為2小時(shí)以?xún)?nèi))的細(xì)胞,先裝載探針,后用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞。對(duì)于細(xì)胞刺激時(shí)間較長(zhǎng)(通常為6小時(shí)以上)的細(xì)胞,先用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞,后裝載探針。
原位裝載探針:本方法僅適用于貼壁培養(yǎng)細(xì)胞。按照1:1000用無(wú)血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA,使終濃度為10微摩爾/升。去除細(xì)胞培養(yǎng)液,加入適當(dāng)體積稀釋好的DCFH-DA。加入的體積以能充分蓋住細(xì)胞為宜,通常對(duì)于六孔板的一個(gè)孔加入稀釋好的DCFH-DA不少于1毫升。37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞三次,以充分去除未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的DCFH-DA。通?;钚匝蹶?yáng)性對(duì)照在刺激細(xì)胞20-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。
收集細(xì)胞后裝載探針:按照1:1000用無(wú)血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA,使終濃度為10微摩爾/升。細(xì)胞收集后懸浮于稀釋好的DCFH-DA中,細(xì)胞濃度為一百萬(wàn)至二千萬(wàn)/毫升,37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。每隔3-5分鐘顛倒混勻一下,使探針和細(xì)胞充分接觸。用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞三次,以充分去除未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的DCFH-DA。直接用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞,或把細(xì)胞等分成若干份后刺激細(xì)胞。通?;钚匝蹶?yáng)性對(duì)照在刺激細(xì)胞20-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。
說(shuō)明:僅在陽(yáng)性對(duì)照孔中加入Rosup作為陽(yáng)性對(duì)照,其余孔不必加入Rosup。
2. 檢測(cè)
對(duì)于原位裝載探針的樣品可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察,或收集細(xì)胞后用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。對(duì)于收集細(xì)胞后裝載探針的樣品可以用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè),用激光共聚焦顯微鏡直接觀察也可以。
3. 參數(shù)設(shè)置
使用488nm激發(fā)波長(zhǎng),525nm發(fā)射波長(zhǎng),實(shí)時(shí)或逐時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)刺激前后熒光的強(qiáng)弱。DCF的熒光光譜和FITC非常相似,可以用FITC的參數(shù)設(shè)置檢測(cè)DCF。
產(chǎn)品組分:
S0033S-1DCFH-DA(10mM)0.1ml
S0033S-2活性氧陽(yáng)性對(duì)照(Rosup, 50mg/ml)1ml
說(shuō)明書(shū)1份
儲(chǔ)存與運(yùn)輸:
-20℃保存,一年有效。
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
品牌? ? ? ? ? ? ?貨號(hào)? ? ? ? ? ? ? ? ? ?名稱(chēng)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?規(guī)格
Beyotime? P0131-5ml? ?抗熒光淬滅封片液(含DAPI)5ml? ?5ml
Beyotime? P0131-25ml? ?抗熒光淬滅封片液(含DAPI)25ml 25ml
關(guān)于公司:
Beyotime創(chuàng)辦于2001年。近20年來(lái)專(zhuān)注于自主研發(fā)和生產(chǎn)。2007年成立上海碧云天生物技術(shù)有限公司,為? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 特新“小巨人”企業(yè),并進(jìn)一步入選第二批第一年建議支持的專(zhuān)精特新“小巨人”企業(yè), 也是G60科創(chuàng)走廊一類(lèi)重點(diǎn)扶持企業(yè)和上海市專(zhuān)精特新中小企業(yè)。江蘇碧云天為江蘇省高新技術(shù)企業(yè),南通市雙創(chuàng)優(yōu)企。公司主要研發(fā)生產(chǎn)生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設(shè)備。
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上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司是一家為生命科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的科學(xué)研究、細(xì)胞治療和生物制藥相關(guān)人員提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技公司,公司主辦的干細(xì)胞搜網(wǎng)(w w w.stemcell.so)為中國(guó)干細(xì)胞領(lǐng)域大資源庫(kù),網(wǎng)站提供:干細(xì)胞治療產(chǎn)品、細(xì)胞培養(yǎng)試劑耗材、臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基、IPS細(xì)胞ES胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基、DC細(xì)胞淋巴細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基、R&D細(xì)胞因子等種類(lèi)豐富的產(chǎn)品;涉及StemCell、HY StemCell、StemRD、CellGenix、PeproTech、Corning、Thermo、Gibco、 PALL、LONZA、BD等國(guó)際公司品牌和生產(chǎn)廠家。以“Yes Service”核心服務(wù)理念,緊緊圍繞“Yes Service focus on Biology 越服務(wù) 專(zhuān)注生物”打造中華民族全新服務(wù)體系,我們與客戶(hù)攜手一起探索生命科學(xué)奧秘,解決人類(lèi)健康問(wèn)題,發(fā)展綠色環(huán)保生態(tài),推動(dòng)世界和諧持續(xù)發(fā)展。
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